高速離心機(jī)分離真菌菌絲體的方法

1、分離方法

1.1 用高速離心機(jī)將6種真菌的發(fā)酵產(chǎn)物分別置于離心管中，在20℃8000r/min條件下離心10min，分離上清液，收集的菌絲體置于培養(yǎng)皿中。

1.2 減壓抽濾法6種真菌的發(fā)酵產(chǎn)物分別用抽濾裝置進(jìn)行常溫減壓抽濾將菌絲體與發(fā)酵液分開。菌絲體保留在濾紙上，發(fā)酵液流入收集瓶中。

1.3 多層紗布過濾法將折疊8層后的紗布放在培養(yǎng)皿中，分別將6種真菌的發(fā)酵產(chǎn)物平攤于紗布，操作者戴無菌乳膠手套，將紗布細(xì)心卷起，雙手反向擰緊紗布，使發(fā)酵液與菌絲體分離，待無液體流下時，輕輕展開紗布，收集菌絲體。

2、測定方法

2.1 分生孢子計數(shù)用血球計數(shù)器將真菌的孢子懸浮液在顯微鏡下計數(shù)。

2.2 菌絲體含水率菌株培養(yǎng)一定時間后，分別取不同菌種的發(fā)酵產(chǎn)物100ml，采用高速離心、真空抽濾和紗布過濾3種方法收集菌絲體，精確稱量菌體濕重（ｇ），然后將菌體在105℃下烘干至恒重，精確稱量干重。

2.3 高速離心法分離的菌絲體與發(fā)酵液采用高速離心法將真菌的發(fā)酵產(chǎn)物離心后，6種真菌均表現(xiàn)為菌絲體與發(fā)酵液分離，形成絮狀或松散沉淀。用移液器將上清液分離后，將菌絲體置于培養(yǎng)皿中發(fā)現(xiàn)，由于菌絲體很輕（只有球毛殼菌的菌絲球堅硬），并且發(fā)酵液粘稠，導(dǎo)致離心后收集的菌絲體中仍含有少量發(fā)酵液。